H&E染色，全稱為蘇木精-伊紅染色（Hematoxylin and Eosin staining），是病理學(xué)中最常用的染色方法之一。這種染色方法可以清晰地顯示組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)和某些病理變化。H&E染色的原理主要涉及到染色劑和組織中的生物大分子（如蛋白質(zhì)）之間的化學(xué)反應(yīng)。蘇木精是一種堿性染色劑，主要與含有酸性基團(tuán)的組織成分（如DNA和RNA）結(jié)合，使其呈現(xiàn)藍(lán)紫色。伊紅是一種酸性染色劑，主要與含有堿性基團(tuán)的組織成分（如膠原纖維和肌纖維）結(jié)合，使其呈現(xiàn)粉紅色。

實驗步驟：

1.  切片脫蠟：將包埋在石蠟中的組織切片放入兩個裝有二甲苯的容器中，每個容器中浸泡10分鐘。這一步是為了去除切片中的石蠟。

2.  酒精脫脂：將切片轉(zhuǎn)移到兩個裝有100%酒精的容器中，每個容器中浸泡10分鐘。這一步是為了去除切片中的脂肪。

3.  酒精水化：將切片依次轉(zhuǎn)移到裝有95%酒精、70%酒精和50%酒精的容器中，每個容器中浸泡5分鐘。這一步是為了使切片逐步水化。

4.  清水洗滌：將切片轉(zhuǎn)移到裝有清水的容器中，浸泡5分鐘。

5.  蘇木精染色：將切片轉(zhuǎn)移到裝有蘇木精染色液的容器中，浸泡5-10分鐘。

6.  清水洗滌：將切片轉(zhuǎn)移到裝有清水的容器中，浸泡1-2分鐘。

7.  伊紅染色：將切片轉(zhuǎn)移到裝有伊紅染色液的容器中，浸泡1-2分鐘。

8.  酒精脫色：將切片依次轉(zhuǎn)移到裝有95%酒精和100%酒精的容器中，每個容器中浸泡5分鐘。

9.  二甲苯透明：將切片轉(zhuǎn)移到裝有二甲苯的容器中，浸泡10分鐘。這一步是為了使切片變得透明。

10.  封片：將切片和封片用封片膠粘合，然后在顯微鏡下觀察。

實驗常見問題和措施：

1.  染色不均：可能是由于切片上的脂肪或蠟沒有完全去除造成的。在染色前應(yīng)確保切片充分脫蠟。

2.  染色過深或過淺：可能是染色時間過長或過短，或者染色液的濃度不適當(dāng)。應(yīng)根據(jù)實際情況調(diào)整染色時間和染色液的濃度。

3.  切片脫落：可能是切片固定不牢或處理過程中力度過大。應(yīng)確保切片的固定牢固，處理過程中要輕柔。

文章出自：HE染色實驗     想了解更多請關(guān)注：http://m.szruiyuan.com/